Ο ρόλος της μεθανόλης και του υπεροξειδίου του υδρογόνου στο IHC;
μεθανόλη:
* σταθεροποιητικό: Η μεθανόλη χρησιμοποιείται ως σταθεροποιητικό Στο IHC, που σημαίνει ότι βοηθά στη διατήρηση της δομής των ιστών και αποτρέψτε την υποβάθμιση . Αυτό είναι ζωτικής σημασίας για τη διατήρηση της ακεραιότητας των αντιγόνων (πρωτεΐνες) που στοχεύουν τα αντισώματα στη διαδικασία χρώσης.
* Διαπερατότητα: Η μεθανόλη λειτουργεί επίσης ως διαπερατή , επιτρέποντας στα αντισώματα να διεισδύουν στην κυτταρική μεμβράνη και να φτάσουν τα αντιγόνα στόχου τους.
* αφυδάτωση: Η μεθανόλη είναι ένας παράγοντας αφυδάτωσης , αφαιρώντας νερό από τον ιστό. Αυτό βοηθά στη βελτίωση της διείσδυσης αντισώματος και μείωση της χρώσης υποβάθρου .
υπεροξείδιο του υδρογόνου:
* Αποκλεισμός της ενδογενούς δραστικότητας υπεροξειδάσης: Το υπεροξείδιο του υδρογόνου χρησιμοποιείται για το μπλοκ ενδογενή δραστηριότητα υπεροξειδάσης , που υπάρχει σε ορισμένους ιστούς. Αυτά τα ένζυμα μπορούν να αντιδράσουν με το χρωμογόνο (η ουσία που δίνει το λεκέ στο χρώμα του) και να παράγει ένα ψευδώς θετικό σήμα, με αποτέλεσμα τη χρώση του υποβάθρου. Το υπεροξείδιο του υδρογόνου απενεργοποιεί αυτά τα ένζυμα , αποτρέποντας τα ψευδή θετικά.
Εδώ είναι μια απλή αναλογία:
* μεθανόλη είναι σαν το doorman ο οποίος εξασφαλίζει ότι οι επισκέπτες (αντισώματα) μπορούν να εισέλθουν στο πάρτι (ιστός) και να φτάσουν με ασφάλεια στον προσκεκλημένο (αντιγόνο).
* Υδροξείδιο του υδρογόνου είναι σαν το φρουρός ασφαλείας ο οποίος διατηρεί τους απροσδιόριστους επισκέπτες (ενδογενή υπεροξειδάση) έξω, έτσι ώστε το κόμμα να μπορεί να απολαμβάνει χωρίς ανεπιθύμητες περισπασμούς.
Σημαντικές σημειώσεις:
* Τόσο η μεθανόλη όσο και το υπεροξείδιο του υδρογόνου είναι ισχυρές χημικές ουσίες Αυτό μπορεί να είναι επιβλαβές εάν δεν αντιμετωπιστεί σωστά.
* Η συγκέντρωση και η διάρκεια της έκθεσης Σε αυτές τις χημικές ουσίες θα πρέπει να βελτιστοποιηθούν προσεκτικά για κάθε τύπο ιστού και αντίσωμα.
* Εναλλακτικά σταθεροποιητικά και μεθόδους αποκλεισμού είναι διαθέσιμα και η επιλογή εξαρτάται από τη συγκεκριμένη εφαρμογή.
Με την κατανόηση του ρόλου αυτών των χημικών ουσιών στο IHC, μπορείτε να εκτιμήσετε τον τρόπο με τον οποίο συμβάλλουν στην επιτυχή απεικόνιση συγκεκριμένων πρωτεϊνών σε δείγματα ιστών.