Μπορεί να χρησιμοποιηθεί χλωριούχο νάτριο για την κατακρήμνιση των πρωτεϊνών;
Πώς λειτουργεί:
* Σλάμα: Το NaCl, όπως και άλλα άλατα, μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την κατακρήμνιση των πρωτεϊνών μέσω μιας διαδικασίας που ονομάζεται "Salting Out". Αυτό περιλαμβάνει την προσθήκη υψηλής συγκέντρωσης αλατιού σε ένα πρωτεϊνικό διάλυμα.
* Μηχανισμός: Τα άλατα όπως το NaCl διαταράσσουν το κέλυφος ενυδάτωσης γύρω από τις πρωτεΐνες, αναγκάζοντάς τα να αλληλεπιδρούν μεταξύ τους και συσσωματώματα, οδηγώντας σε βροχόπτωση.
Περιορισμοί:
* συγκέντρωση άλατος: Το NaCl απαιτεί σχετικά υψηλές συγκεντρώσεις (περίπου 2-3Μ) για να καθορίζουν αποτελεσματικά τις πρωτεΐνες. Αυτό μπορεί να είναι προβληματικό για ορισμένες εφαρμογές, καθώς οι υψηλές συγκεντρώσεις αλατιού μπορούν:
* Πρωτεΐνες βλάβης
* Παρεμβαίνει με τις μεταγενέστερες προσδιορισμούς
* Απαιτούν εκτεταμένα βήματα αφαλάτωσης
* Επιλεκτικότητα: Το NaCl δεν είναι πολύ επιλεκτικό στην καθίζηση πρωτεΐνης. Τείνει να καταβυθίζει ένα ευρύ φάσμα πρωτεϊνών, καθιστώντας το λιγότερο χρήσιμο για την απομόνωση συγκεκριμένων πρωτεϊνών.
* Άλλες επιλογές: Άλλα άλατα, όπως το θειικό αμμώνιο, χρησιμοποιούνται συχνότερα για την κατακρήμνιση των πρωτεϊνών λόγω της υψηλότερης αποτελεσματικότητάς τους σε χαμηλότερες συγκεντρώσεις και καλύτερη εκλεκτικότητα.
όταν το NaCl μπορεί να είναι χρήσιμο:
* Προκαταρκτικός καθαρισμός: Το NaCl μπορεί να χρησιμοποιηθεί για ένα ακατέργαστο αρχικό βήμα βροχόπτωσης για την απομάκρυνση ενός σημαντικού τμήματος πρωτεϊνών πριν από τον περαιτέρω καθαρισμό.
* Εναλλακτική λύση χαμηλού κόστους: Το NACL είναι φθηνό και άμεσα διαθέσιμο, καθιστώντας την βιώσιμη επιλογή για απλές εφαρμογές βροχοπτώσεων όταν η υψηλή καθαρότητα ή η επιλεκτικότητα δεν είναι κρίσιμη.
Συνοπτικά:
Ενώ η NaCl μπορεί να χρησιμοποιηθεί για βροχοπτώσεις πρωτεΐνης, δεν είναι η πιο προτιμώμενη μέθοδος λόγω των περιορισμών της. Άλλα άλατα όπως το θειικό αμμώνιο ή πιο συγκεκριμένες μέθοδοι όπως η βροχόπτωση οργανικών διαλύτη είναι συχνά πιο αποτελεσματικές και αποτελεσματικές.
