Τι είναι το αιμοκυτταρόμετρο;

Το αιμοκυτταρόμετρο είναι μια εξειδικευμένη διαφάνεια που χρησιμοποιείται για τη μέτρηση των κυττάρων. Στην πραγματικότητα είναι μια γυάλινη τσουλήθρα που έχει χαραγμένο ένα πλέγμα 3×3. Χαραγμένες σε αυτό είναι περίπλοκες, χαραγμένες με λέιζερ γραμμές που σχηματίζουν ένα πλέγμα. Έχει και το δικό του καλυπτράκι.

Όποιος έχει οποιαδήποτε σχέση με τη μικροβιολογία, τη βιοτεχνολογία, την παθολογία ή άλλους συναφείς τομείς πρέπει να είναι εξοικειωμένος με ένα αιμοκυτταρόμετρο. Χρησιμοποιείται για τη μέτρηση διαφορετικών μικροσωματιδίων ή μικροοργανισμών, ένα αιμοκυτταρόμετρο είναι μια ειδική διαφάνεια και πολύ πιο ακριβό από μια μέση γυάλινη πλάκα.

Μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη μέτρηση του αριθμού των ερυθρών αιμοσφαιρίων σε ένα δείγμα και των λευκών αιμοσφαιρίων, μικροβίων όπως ζυμομύκητες και πολλών άλλων.

Τι είναι το αιμοκυτταρόμετρο;

Το αιμοκυτταρόμετρο μοιάζει με μια μέση γυάλινη τσουλήθρα, μόνο πιο βαρύ από απόσταση, αλλά είναι πολύ περισσότερο από αυτό. Έχει επίσης τη δική του καλυπτρίδα, η οποία είναι διαφορετική από μια κανονική καλυπτρίδα. Στη διαφάνεια, υπάρχουν σημειωμένες αυλακώσεις που φαίνονται σαν «H». Η οριζόντια γραμμή του 'H' χωρίζει τα 2 πλέγματα για μέτρηση. Επομένως, κάθε διαφάνεια έχει δύο πανομοιότυπα πλέγματα για μέτρηση κελιών. Το βάθος αυτών των 2 πλεγμάτων είναι σταθερό 0,1 mm

Επιμελητήριο Neubauer (Φωτογραφία:Wikimedia Commons)

Ας μιλήσουμε για τα πλέγματα.

Υπολογισμός αιμοκυτταρόμετρου

Κάθε πλέγμα είναι ένα τετράγωνο με διαστάσεις 3×3 mm2. Αυτό το τετράγωνο έχει τρεις ίσες κάθετες και οριζόντιες γραμμές. Αυτά το χωρίζουν σε 9 μικρότερα τετράγωνα 1×1 mm2 το καθένα. Αυτά χωρίζονται το ένα από το άλλο με τριπλές γραμμές. Από αυτά τα 9 τετράγωνα, τα 4 γωνιακά τετράγωνα χρησιμοποιούνται για την καταμέτρηση μεγαλύτερων κυττάρων, όπως τα λευκά αιμοσφαίρια, ενώ το κεντρικό τετράγωνο χρησιμοποιείται για τη μέτρηση μικρότερων κυττάρων, όπως τα RBC.

Τα 4 γωνιακά τετράγωνα του κύριου πλέγματος χωρίζονται περαιτέρω σε 16 μικρότερα κελιά. Το κεντρικό τετράγωνο του κύριου πλέγματος χωρίζεται σε 25 μικρότερα τετράγωνα, καθένα από τα οποία χωρίζεται και πάλι σε 16 μικρότερα τετράγωνα. Το δείγμα που θα μετρηθεί φορτώνεται στη διαφάνεια μετά η καλυπτρίδα έχει τοποθετηθεί. Η περίσσεια υγρού αποστραγγίζεται στις αυλακώσεις στο πλάι. Ωστόσο, το άτομο που φορτώνει το δείγμα πρέπει να είναι εξαιρετικά προσεκτικό κατά τη φόρτωση.

Πλέγμα μέτρησης

Αυτό καλύπτει τη δομή και το σχεδιασμό του αιμοκυτταρόμετρου, αλλά για να κατανοήσουμε πώς γίνεται η μέτρηση και ο υπολογισμός, ας εξετάσουμε το παράδειγμα της μέτρησης των λευκών αιμοσφαιρίων για τα γωνιακά τετράγωνα και των ερυθρών αιμοσφαιρίων για το κεντρικό τετράγωνο.

Αιμοκυτταρομετρική μέτρηση

Τα ερυθρά αιμοσφαίρια, που είναι μικρότερα σε μέγεθος και μεγαλύτερα σε αριθμό, μετρώνται στο κεντρικό τετράγωνο. Αυτό έχει μεγαλύτερο αριθμό τμημάτων και επομένως διευκολύνει την καταμέτρηση. Όπως αναφέρθηκε παραπάνω, το κεντρικό τετράγωνο περιέχει 25 μικρότερα τετράγωνα. Το εμβαδόν καθενός από αυτά είναι 1/25 mm2, δηλαδή 0,04 mm2. Μόλις φορτωθεί το δείγμα, δεν μετρώνται όλα τα κελιά. Από τα 25, επιλέγονται οποιαδήποτε 5 τετράγωνα για την καταμέτρηση. Η διαίρεση καθενός από αυτά τα τετράγωνα 0,04 mm2 σε 16 μικρότερα διευκολύνει το άτομο να μετρήσει τον αριθμό των κελιών αντί να χρειάζεται απλώς να μετρήσει σε ένα κενό τετράγωνο. Υπάρχει ένας αριθμός μοτίβων για να επιλέξετε τα 5 τετράγωνα που πρέπει να μετρηθούν. Μπορείτε να επιλέξετε τη γωνία 4 και το κεντρικό τετράγωνο ή οποιαδήποτε από τις διαγώνιες γραμμές των τετραγώνων.

Κεντρικό τετράγωνο αιμοκυτταρόμετρου

Αφού μετρηθεί ο αριθμός των κελιών σε 5 τετράγωνα, λαμβάνεται ο μέσος όρος τους.

Ας ‘n '' να είσαι ο μέσος.

Επομένως, ο μέσος αριθμός κελιών σε καθένα από τα μικροσκοπικά τετράγωνα 0,04 mm2 είναι n . Ο όγκος καθενός από αυτά τα κύτταρα είναι 0,04 x 0,1 =0,004 mm3. Ο αριθμός των κελιών σε 1 mm3 είναι n /0,004.

Έτσι, ο συνολικός αριθμός κυττάρων σε 1 ml είναι (n /0,004) x 1000. Πολλαπλασιάζουμε επί χίλια ως 1000 mm3 =1 cm3; και 1 cm3 =1 mL

Μοτίβο μέτρησης για το κεντρικό τετράγωνο

Αριθμός WBC

Όταν καταμετρώνται τα WBC, ο υπολογισμός είναι πολύ πιο εύκολος. Τα WBC μετρώνται στα 4 γωνιακά τετράγωνα του κύριου πλέγματος. Αυτά τα τετράγωνα έχουν εμβαδόν 1 mm2 το καθένα. Για να ληφθεί η μέτρηση WBC, μετράται ο αριθμός των κυττάρων σε κάθε τετράγωνο και στη συνέχεια υπολογίζεται ο μέσος όρος τους. Αφήστε το μέσο να είναι «n». Ο όγκος κάθε τετραγώνου είναι 1 x 0,1 =0,1 mm3. Ο αριθμός των κυττάρων σε 1 mm3 είναι n/0,1. Επομένως, ο συνολικός αριθμός κυττάρων σε 1ml είναι (n/0,1) x 1000. Πολλαπλασιάζουμε επί χίλια ως 1000 mm3 =1 cm3. και 1 cm3 =1 mL

Κανόνες που πρέπει να τηρούνται

Κατά την καταμέτρηση των κυττάρων, ορισμένα πράγματα απαιτούν προσοχή. Μερικά κελιά μπορεί να μην βρίσκονται είτε μέσα είτε έξω από το τετράγωνο. Μάλλον μπορεί να πέσουν στα σύνορα. Επομένως, ακολουθείται μια απλή πρακτική συμπερίληψης κελιών που πέφτουν στο επάνω και αριστερό περίγραμμα και εξαίρεσης κελιών που πέφτουν στο κάτω και στο δεξί περίγραμμα. Ωστόσο, αυτό δεν είναι κανόνας. Η βασική αρχή είναι ότι οποιαδήποτε 2 παρακείμενα σύνορα πρέπει να μετρώνται και τα υπόλοιπα 2 σύνορα πρέπει να απορρίπτονται. Επίσης, αυτά τα κριτήρια επιλογής πρέπει να ισχύουν για όλα τα τετράγωνα που καταμετρώνται.

Κανόνας συνόρων

Μερικές φορές το διάλυμα του δείγματος μπορεί να είναι πολύ συμπυκνωμένο. Εάν είναι πολύ συγκεντρωμένο, τα κύτταρα αλληλοεπικαλύπτονται και επομένως η μέτρηση είναι εσφαλμένη.

Επομένως, τέτοια συμπυκνωμένα κυτταρικά διαλύματα πρέπει να αραιώνονται με κατάλληλο διάλυμα. Αυτή η αραίωση πρέπει επίσης να λαμβάνεται υπόψη στους υπολογισμούς. Εάν, για παράδειγμα, το δείγμα αραιώθηκε 10 φορές, η τελική απάντηση από τους υπολογισμούς πρέπει να πολλαπλασιαστεί επί 10.

Η κατανόηση του τρόπου με τον οποίο λειτουργεί ένα αιμοκυτταρόμετρο είναι απαραίτητη για έναν αριθμό εργαστηριακών εξετάσεων, καθώς έχουν ακρίβεια εντός του 20% των αυτοματοποιημένων απαντήσεων.

Λοιπόν… καλώς ήρθες! Τώρα ξέρετε πώς να χρησιμοποιείτε ένα αιμοκυτταρόμετρο… θεωρητικά.