Τι δημιουργείται με τη θεραπεία του DNA με ένζυμα περιορισμού για τη δημιουργία θραυσμάτων που τους επιτρέπουν να ταξιδεύουν σε ηλεκτρική ενέργεια με γέλη αγαρόζης και να καταγράφουν τα αποτελέσματα ενός τύπου εικόνας;
* Ένζυμα περιορισμού: Αυτά τα ένζυμα δρουν όπως το μοριακό ψαλίδι, το κοπτικό DNA σε συγκεκριμένες αλληλουχίες.
* θραύσματα DNA: Όταν τα ένζυμα περιορισμού κόβουν το DNA, παράγουν θραύσματα διαφορετικών μεγεθών.
* ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης: Αυτή η τεχνική διαχωρίζει θραύσματα DNA με βάση το μέγεθος. Τα θραύσματα φορτώνονται σε ένα πήκτωμα και εφαρμόζεται ένα ηλεκτρικό ρεύμα. Μικρότερα θραύσματα κινούνται ταχύτερα μέσω του πηκτώματος, με αποτέλεσμα ένα μοτίβο ζωνών.
* εικόνα: Τα διαχωρισμένα θραύσματα DNA απεικονίζονται χρησιμοποιώντας μια βαφή που δεσμεύεται με το DNA, δημιουργώντας ένα πρότυπο ζωνών που μπορούν να ληφθούν ως εικόνα.
Εδώ λειτουργεί η ανάλυση RFLP:
1. Εκχύλιση DNA: Το DNA εξάγεται από δείγμα (π.χ. αίμα, ιστός).
2. Το DNA κόβεται με συγκεκριμένα ένζυμα περιορισμού.
3. ηλεκτροφόρηση πηκτής αγαρόζης: Τα θραύσματα DNA που έχουν αφομοιωθεί διαχωρίζονται κατά μέγεθος χρησιμοποιώντας ένα ηλεκτρικό ρεύμα.
4. Οπτικοποίηση: Τα θραύσματα απεικονίζονται χρησιμοποιώντας μια βαφή που συνδέεται με το DNA.
5. Ανάλυση: Το προκύπτον πρότυπο ζωνών (η "εικόνα") αναλύεται για τον εντοπισμό διαφορών στις αλληλουχίες DNA.
Χρήσεις ανάλυσης RFLP:
* Γενετικά δακτυλικά αποτυπώματα: Χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό ατόμων, τον προσδιορισμό της πατρότητας και την επίλυση εγκλημάτων.
* Γενετική χαρτογράφηση: Χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό γονιδίων σε χρωμοσώματα.
* Διάγνωση της νόσου: Χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό γενετικών μεταλλάξεων που σχετίζονται με ασθένειες.
* Εξελικτικές μελέτες: Χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό των εξελικτικών σχέσεων μεταξύ των οργανισμών.
Η ανάλυση RFLP είναι ένα ισχυρό εργαλείο για τη μελέτη του DNA και έχει ευρείες εφαρμογές στη βιολογία, την ιατρική και την εγκληματολογία.
